Inhoud
- stadia
- Methode 1 Observeer de bacteriën direct
- Methode 2 Meten van biomassa
- Methode 3 Ga door met turbidimetrie
Er zijn verschillende manieren om de groei van bacteriën te meten, en sommige zijn moeilijker dan andere om te implementeren. De eenvoudigste worden vaak gebruikt en geven relatief nauwkeurige resultaten, mits ze rigoureus zijn tijdens metingen. De meest gebruikelijke technieken zijn het observeren en tellen van bacteriën, het meten van biomassa en droge biomassa en turbidimetrie. Je schoollab moet de apparatuur hebben die nodig is voor ten minste een van deze methoden.
stadia
Methode 1 Observeer de bacteriën direct
-
Bereid de apparatuur voor. Naast wat gewoonlijk in alle biologielabs wordt gevonden, hebt u enkele specifieke items nodig. Zorg ervoor dat u alle instrumenten en containers binnen handbereik hebt, zodat u niet heen en weer hoeft te gaan in de kast waar de apparatuur is opgeslagen. Denk vooruit aan wat je gaat doen om te weten wat je in elke fase gaat gebruiken. U zult ook enkele sleutelbegrippen moeten kennen.- Koop een hemacytometer. Het is een mes met nummeringskamers dat wordt geassocieerd met een microscoop. Het is een zeer eenvoudig instrument om aan te passen en te gebruiken. U kunt enkele leveranciers vinden die gespecialiseerd zijn in apparatuur voor scholen en onderzoekslaboratoria. Meestal wordt een gebruikershandleiding verstrekt.
- Neem een petrischaaltje. Dit is een kleine, ronde, ondiepe container waar je bacteriën kunt observeren.
- De term "cultuur" verwijst naar een micro-organisme dat kunstmatig wordt gepropageerd als onderdeel van een wetenschappelijk experiment.
- De "bouillon van cultuur" is het medium waarin de cultuur zich zal ontwikkelen.
-
Gebruik de petrischaal. Leg de bacteriën in de doos en bekijk het onder een microscoop. U kunt het ook rechtstreeks op een dia plaatsen. Tel vervolgens het aantal aanwezige bacteriecellen. -
Zorg voor de juiste concentratie. Als er teveel bacteriën zijn, overlappen deze elkaar en kunt u ze niet correct tellen. Als dit het geval is, verdun de cultuur door het te mengen met een beetje bouillon. Als er te weinig zijn, is het resultaat niet significant. U moet dan de bouillon filteren om de concentratie te verhogen. -
Tel de bacteriën. De laatste stap is gewoon tellen. Kijk naar de telkamers onder de microscoop en noteer het aantal cellen dat u ziet. Vergelijk het resultaat met andere vergelijkbare ervaringen.
Methode 2 Meten van biomassa
-
Controleer of u over de nodige instrumenten beschikt. Deze methode is traag te implementeren en vereist het gebruik van dure apparatuur. Als je het niet wast, gebruik dan een andere techniek. Aan de andere kant, als het laboratorium waar u zich bevindt het juiste gereedschap heeft, is de meting van biomassa en droge massa ideaal omdat het nauwkeurige resultaten oplevert. Je hebt nodig:- een geforceerde convectie hydraulische oven,
- een aluminium weegpan,
- verschillende Erlenmeyer-kolven,
- een centrifuge of een laboratoriumfiltratiesysteem.
-
Controleer of het gewas zich in een Erlenmeyer-kolf bevindt. Als dit niet het geval is, giet het erin. In dit stadium van het experiment zitten de bacteriën nog in de kweekbouillon. Ze worden later gescheiden. -
Droog de weegpan. Plaats het hiervoor in de oven. U kunt ook een celluloseacetaatmembraan met een diameter van 47 mm en poriën van 0,45 μm gebruiken. Welk gereedschap u ook gebruikt, meet de massa nauwkeurig zodat het kan worden afgetrokken van de resultaten die u krijgt wanneer het gewas erop wordt geplaatst. -
Mix. Schud lerlenmeyer zodat de cultuur homogeen is. Vanwege de zwaartekracht vallen de cellen inderdaad van nature naar de bodem van de container. Je moet dus een beetje schudden, die op een uniforme manier worden verdeeld en dat je steekproef representatiever is. -
Centrifuge. Gebruik de centrifuge om de bacteriën van de kweekbouillon te scheiden. Dit apparaat wordt gebruikt om de container en een contragewicht met een zeer hoge snelheid te draaien. De bouillon stroomt, waardoor alleen levende materie blijft. Voor meer informatie vindt u informatie over het gebruik van een centrifuge op internet. -
Pak het deeg. Laat het op de weegschaal vallen. Je kunt de cultuurbouillon gooien, je hebt het niet meer nodig, maar houd lerlenmeyer bij de hand. -
Spoel de centrifuge af. Giet het spoelwater in de weegpan naast de bacteriecellen. Het verkregen resultaat voor alles geeft u biomassa. -
Vind de droge massa. Om de droge biomassa van uw monster te kennen, plaatst u de weegpan gedurende 6 tot 24 uur in de oven op 100 ° C, volgens de instructies die bij uw apparaat zijn geleverd. Zorg ervoor dat u deze temperatuur niet overschrijdt om brandende bacteriën te voorkomen. Weeg vervolgens alles en trek vervolgens de massa van de lade af.
Methode 3 Ga door met turbidimetrie
-
Bereid uw apparatuur voor. Je hebt een lichtbron en een spectrofotometer nodig, een apparaat dat je in de meeste wetenschappelijke laboratoria aantreft. Raadpleeg de meegeleverde gebruikershandleiding omdat elk model zijn eigen werking heeft. Deze methode is een van de meest gebruikte voor het meten van bacteriegroei, omdat het alleen goedkope en gebruiksvriendelijke tools vereist. -
Breng licht in de cultuur. Troebelheid wordt gebruikt om de inhoud van een vloeistof in deeltjes te evalueren, het komt overeen om te bepalen of het min of meer troebel is. Het resultaat dat u van deze meting krijgt, wordt gegeven in NTU (of nefelometrische troebelheidseenheden). Het kan nodig zijn om het apparaat te kalibreren om de troebelheid van het monster nauwkeurig te meten. -
Maak aantekeningen. Troebelheid is de hoeveelheid bacteriën in het monster. Met de spectrofotometer kunt u ook de transmissie van de oplossing (% T) weten, waarvan de waarde omgekeerd evenredig is met die van troebelheid. Vergelijk vervolgens de resultaten verkregen op verschillende monsters om de bacteriegroei te meten.